domingo, 26 de mayo de 2013

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA


ADN recombinante (ADNr) es una forma de ADN artificial que se crea mediante la combinación de dos o más secuencias que normalmente no ocurren al mismo tiempo.
En cuanto a la modificación genética, se crea a través de la introducción de ADN pertinentes en un ADN existente de organismos, tales como los plásmidos de las bacterias, para codificar o alterar las características diferentes para un propósito específico, tales como resistencia a los antibióticos.
Una proteína recombinante es una proteína que se obtiene a partir del ADN recombinante.
Producción en células de insecto
Más cercanas aún a las células humanas
son las de insecto, como las de Spodoptera frugiperda (una polilla parásito del maíz y del algodón), que se cultivan fácilmente in Vitro, aunque el medio de cultivo es caro. Dicho medio, además, no contiene suero, lo que hace más fácil el procesado de la proteína. Otra de las propuestas ha sido el uso no de células de insecto, sino de los insectos completos para la producción de estas proteínas. Para ello se infectan a los insectos con baculovirus modificados (que además no infectan a los seres humanos) para que expresen la proteína recombinante. Sin embargo, este sistema presenta exactamente el mismo problema que el de levaduras: que las células de insecto presentan glicosilación, pero esta es totalmente distinta a la de mamíferos.



BIBLIOGRAFIA:

http://comoserecombinaeladnenlanaturaleza.blogspot.com/





domingo, 19 de mayo de 2013

TECNICAS MOLECULARES PARA CANCER DE MAMA


La Inmunohistoquimica IHQ es una técnica semicuantitativa usada para la cuantificación de la expresión de proteínas; revela diferentes topes de la proteína presentes en la superficie de la célula, y es la técnica más usada para detectar y cuantificar la proteína HER2/neu en primera instancia. Esta técnica detecta el receptor del HER2/neu sobre la membrana celular por medio de anticuerpos que se unen al receptor del HER2/neu. 


La FISH es un método molecular citogenético que permite cuantificar el número de copias de un gen; es usada en la investigación de anormalidades en genes y cromosomas. La FISH es considerada actualmente el estándar de oro para evaluar la amplificación del HER2/neu, debido a que los estudios del uso del trastuzumab muestran que la predicción de respuesta al tratamiento es superior usando FISH. Adicionalmente, la FISH tiene una sensibilidad y especificidad del 98% y 100%, respectivamente. 

 

domingo, 12 de mayo de 2013

RESUMEN DE LOS MECANISMO GENETICOS MOLECULARES DEL CANCER DE MAMA


GENOMICO
El análisis genómico del cáncer de mama ha permitido el desarrollo de nuevas herramientas de predicción de riesgo y respuesta al tratamiento en esta enfermedad. Los perfiles de expresión génica han generado una mejor clasificación de los tumores.
PROTEOMICO
•          Antígeno carcinoembrionario
•          Receptor de estrógenos
•          Receptor de progesterona
•          Receptor del factor de crecimiento epidérmico humano 2 (HER-2)

 TRANSCRIPCIONAL
El estudio subsecuente de las células que carecían de expresión permitió revelar que estas proteínas son esenciales para la expresión de un vasto programa transcripcional en las células de cáncer de mama.
 El siguiente paso consistió en averiguar si esta “firma genética” pro-metastática podía tener interés desde un punto de vista terapéutico o de diagnóstico clínico. Para el primer objetivo, los investigadores seleccionaron genes pertenecientes a esa “firma genética” que codifican moléculas con potencial terapéutico (esto es, que pudiesen ser inhibidas por métodos clásicos como fármacos, anticuerpos, microRNAs, etc.) en esta enfermedad.
TRADUCCIONAL
Estudios iniciales en cáncer de mama han demostrado que es posible diferenciar tejido normal de tumores mediante patrones de expresión de micro-RNA: los que presentan un mayor cambio son mir-125b, mir-145, mir-21 y mir-155. Asimismo, se ha demostrado que genes relevantes en la transformación neoplásica de la mama son susceptibles a la regulación por micro-RNA, como en el caso de ERBB2 y ERBB3,receptor de estrógenos,tropomiosina 129 y caderina E,entre otros. 

BIBLIOGRAFIA 


sábado, 4 de mayo de 2013

PCR EN CANCER DE MAMA

Se han identificado numerosos genes cuyas alteraciones afectan el crecimiento normal de la célula, llevándola al desarrollo y progresión del cáncer de mama.
Uno de estos genes es el HER2/neu. La proteína codificada por el gen HER2/neu se encuentra sobreexpresada en un 25%-30% de los cánceres
de mama; así, el HER2/neu es el oncogén de más alta incidencia en esta enfermedad.


En el caso de la cuantificación de la expresión del gen HER2/neu, la plataforma de PCR en tiempo
real más usada es la del kit LightCycler,  el cual emplea primers y sondas de hibridación específicas. En la reacción de PCR se amplifica un fragmento de 112 pb del gen HER2/
neu y otro de 133 pb de un gen de expresión constitutiva de referencia (gastrina), a partir del DNA genómico humano, usando primers específicos. 
Ambos genes se cuantifican con dos sondas de hibridación específicas en el mismo capilar

BIBLIOGRAFIA

http://www.cancer.gov.co/documentos/RevistaCC2007%20Vol%2011(1)/rccv11n1a06.pdf